96 孔 PCR 儀是一種基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)的儀器,通過 96 孔反應(yīng)板實現(xiàn)一次性處理 96 個樣本的基因擴增,適用于高通量檢測場景。其設(shè)計**是通過精確控溫(加熱、冷卻、恒溫)實現(xiàn) DNA 的變性、退火、延伸循環(huán),廣泛應(yīng)用于科研、臨床、農(nóng)業(yè)、司法等領(lǐng)域。臨床與醫(yī)學(xué)檢測大規(guī)模病原體篩查應(yīng)用:、流感病毒、HPV 等傳染病的批量檢測(如醫(yī)院檢驗科、疾控中心)。案例:**期間,96 孔 PCR 儀配合自動化移液工作站,單日可完成數(shù)千份樣本的核酸提取與擴增。遺傳疾病批量診斷應(yīng)用:同時檢測多個樣本的致病基因突變(如地中海貧血、脊髓性肌萎縮癥)。常規(guī) qPCR 儀與快速 qPCR 儀:快速 qPCR 儀通過優(yōu)化加熱模塊,縮短升降溫時間,提高實驗效率。江蘇梯度基因擴增儀PCR儀代理商
多重 PCR 與多基因檢測場景:同時擴增多個靶基因(如病原體分型、遺傳標(biāo)記檢測),需平衡不同引物對的退火溫度。例:在 HPV 分型檢測中,使用梯度 PCR 優(yōu)化 14 種型別引物的共同退火溫度,避免因單一溫度導(dǎo)致部分型別漏檢。 科研方法開發(fā)與驗證場景:建立新的 PCR 檢測方法(如巢式 PCR、實時熒光定量 PCR 的預(yù)實驗)時,需系統(tǒng)優(yōu)化溫度、時間、酶濃度等參數(shù)。例:開發(fā)某**突變基因的檢測方法時,通過梯度功能同時測試 3 個不同退火溫度和 2 種酶濃度組合,共 6 種條件,快速確定比較好反應(yīng)體系。南京梯度基因擴增儀PCR儀要多少錢RePure-T的梯度溫控技術(shù)能夠在各個樣本槽之間精確地設(shè)置不同的溫度。
PCR 儀的**組成與功能:1. 溫控系統(tǒng)關(guān)鍵部件:加熱模塊(如半導(dǎo)體加熱片、熱板)、溫度傳感器(熱電偶或紅外傳感器)。技術(shù)要求:溫度范圍:通常為 4-100℃,覆蓋 PCR 各階段需求??販鼐龋骸?.1-0.5℃,確保引物特異性結(jié)合和酶活性穩(wěn)定。升降溫速率:常見為 3-8℃/s,高速 PCR 儀可達 10℃/s 以上,縮短反應(yīng)時間。2. 反應(yīng)模塊樣本容量:常見規(guī)格:96 孔板(單孔 20-100μL)、384 孔板(低通量)、單管 / 8 聯(lián)管(適合少量樣本)。特殊設(shè)計:梯度 PCR 儀可在同一反應(yīng)中設(shè)置不同孔位的退火溫度,用于優(yōu)化引物條件。3. 控制系統(tǒng)與軟件功能:預(yù)設(shè) PCR 程序(如 touchdown PCR、巢式 PCR)、實時監(jiān)控溫度曲線、存儲實驗數(shù)據(jù)。界面:觸摸屏或電腦端操作,支持程序編輯和個性化設(shè)置。
PCR 儀的維護與注意事項:日常維護:定期清潔反應(yīng)模塊,去除殘留試劑(如礦物油、PCR 產(chǎn)物),避免污染。校準(zhǔn)溫度:使用標(biāo)準(zhǔn)溫度計驗證控溫精度,每年至少 1 次。操作注意:配置反應(yīng)體系時需在冰上進行,防止引物或酶提前活化。避免頻繁開關(guān)儀器,減少溫控模塊損耗。實驗后及時進行模塊消毒(如用 75% 乙醇擦拭),防止交叉污染。PCR 儀的發(fā)展趨勢:便攜化與集成化:微流控芯片 PCR 儀將反應(yīng)體系微型化,可實現(xiàn) “樣本進 - 結(jié)果出” 的即時檢測(如 POCT 設(shè)備)。高通量與自動化:結(jié)合機器人工作站,實現(xiàn)從樣本提取到 PCR 擴增的全流程自動化,適用于大規(guī)模篩查。多功能整合:如與測序儀聯(lián)用,實現(xiàn) “擴增 - 測序” 一體化,縮短基因分析周期。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算初始模板的濃度,實現(xiàn)定量分析。
樣本采集:根據(jù)檢測對象不同,采集具有代表性的樣本。對于農(nóng)作物,需從不同部位如葉片、種子等采集適量樣品;對于加工食品,要考慮其成分復(fù)雜性,盡可能從多個部位或不同包裝中取樣,確保樣本能多方面反映被檢物的情況。樣本粉碎:采集后的樣本若為固體,需進行粉碎處理,以便后續(xù)提取核酸??墒褂醚心x、粉碎機等設(shè)備將樣本粉碎成均勻的粉末狀,增加核酸提取的效率和均勻性。核酸提取:利用核酸提取試劑盒或相關(guān)提取方法,從粉碎的樣本中提取 DNA 或 RNA。常見的方法有 CTAB 法、SDS 法等,提取過程需嚴(yán)格按照操作說明進行,以保證提取的核酸純度和完整性。核酸定量與質(zhì)量檢測:采用核酸定量儀,如分光光度計、熒光定量儀等,對提取的核酸進行定量分析,確定其濃度和純度。同時,通過瓊脂糖凝膠電泳檢測核酸的完整性,確保核酸無降解,滿足后續(xù) PCR 檢測要求。在傳統(tǒng) PCR 基礎(chǔ)上增加了熒光檢測系統(tǒng),可實時監(jiān)測擴增過程中熒光信號的變化,實現(xiàn)對初始模板的定量分析。48孔基因擴增儀PCR儀微量檢測
技術(shù)成熟,儀器穩(wěn)定性高,軟件操作便捷,兼容性強,廣泛應(yīng)用于科研和臨床領(lǐng)域。江蘇梯度基因擴增儀PCR儀代理商
**技術(shù)參數(shù):決定實驗精度與可靠性:1. 溫控性能控溫范圍:需覆蓋 4-100℃,滿足變性(94-96℃)、退火(50-65℃)、延伸(72℃)全流程需求??販鼐龋骸?.1-0.5℃為優(yōu),精度不足可能導(dǎo)致引物非特異性結(jié)合或酶活性降低(如退火溫度波動易引發(fā)假陽性)。溫度均勻性:各孔位溫差≤0.5℃,若均勻性差,同批次樣本擴增效率可能不一致,影響結(jié)果重復(fù)性。升降溫速率:常規(guī) PCR 儀速率為 3-8℃/s,高速機型可達 10℃/s 以上,可縮短單循環(huán)時間(如 30 個循環(huán)從 2 小時壓縮至 1 小時)。2. 反應(yīng)模塊兼容性樣本通量:低通量:單管、8 聯(lián)管(適合少量樣本,如科研初篩、臨床單樣本檢測);中高通量:96 孔板(常規(guī)批量檢測)、384 孔板(超高通量,如基因芯片預(yù)處理)。梯度功能:梯度 PCR 儀可在同一模塊設(shè)置 3-5℃的溫度梯度(如 55-60℃),用于優(yōu)化引物退火溫度,減少預(yù)實驗次數(shù)。江蘇梯度基因擴增儀PCR儀代理商