elisa試劑盒操作所需主要設(shè)備,包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液)洗滌緩沖液,稀釋液,終止液,底物緩沖液,TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液,ABTS使用液,抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。正常人血清和陽(yáng)性對(duì)照血清。聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,elisa試劑盒檢測(cè)儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。4℃冰箱,37℃孵育箱。試驗(yàn)原理,試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(elisa試劑盒).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)??梢韵葘⑸锼貥?biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。2148397 elisa試劑盒濃縮方式:氮?dú)獯蹈沙s,壓縮空氣吹干除雜。玉環(huán)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
關(guān)于elisa試劑盒溫育,在實(shí)際測(cè)定操作中一定要注意以下幾點(diǎn):要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時(shí)間。一般來(lái)說(shuō),加完樣本和/或反應(yīng)試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時(shí),其孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時(shí)間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時(shí)間可能還比較長(zhǎng),而在臨床實(shí)驗(yàn)室中,很少有人注意這個(gè)問(wèn)題,通常是將微孔板一放入溫箱即開(kāi)始計(jì)時(shí),這樣就很容易造成實(shí)際測(cè)定中溫育時(shí)間不夠,弱陽(yáng)性樣本測(cè)不出來(lái)的問(wèn)題。為保證37℃下足夠的溫育時(shí)間,臨床實(shí)驗(yàn)室可自行確定本實(shí)驗(yàn)室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長(zhǎng)時(shí)間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃,從而適當(dāng)延長(zhǎng)板條在溫箱中的放置時(shí)間。揚(yáng)中瘦素(LEP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Elisa 試劑盒可檢測(cè)生物樣本中的多肽。
商品試劑與標(biāo)準(zhǔn)液按檢測(cè)項(xiàng)目組合成套放在個(gè)包裝盒內(nèi)叫試劑盒(reagentkit),或叫試劑組合(reagentset)。為了增強(qiáng)其識(shí)別試劑質(zhì)量的能力,提高拒用劣質(zhì)試劑的自覺(jué)性,掌握有關(guān)elisa試劑盒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量評(píng)價(jià)是十分有益的。可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō),不需要熒光顯微鏡,也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置。
elisa試劑盒檢定中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免針眼壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測(cè)定需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液過(guò)程迅速完成。Elisa試劑盒的適用范圍非常普遍,可以應(yīng)用于流行病學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物技術(shù)等領(lǐng)域。
小鼠酸脫氫酶α(PDHa)Elisa試劑盒:用抗小鼠PDHa抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品中的PDHa會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠PDHa抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素??剐∈驪DHa抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠酸脫氫酶α(PDHa)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒小鼠酸脫氫酶α(PDHa)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色的底物,TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變黃。Elisa試劑盒通常分為直接Elisa、間接Elisa、競(jìng)爭(zhēng)性Elisa等不同類型。L選擇素(SELL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Elisa 試劑盒的檢測(cè)結(jié)果具有參考性。玉環(huán)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
elisa試劑盒使用建議:1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免針眼。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)較后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。玉環(huán)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)