重組人TNFSF12蛋白(hFcTag)是一種在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的重組蛋白,融合了hFc標(biāo)簽,便于純化和檢測(cè)。TNFSF12(TumorNecrosisFactorSuperfamilyMember12),也稱為TWEAK(TNF-likeweakinducerofapoptosis),是TNF超家族的重要成員,廣參與免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞存活、炎癥反應(yīng)和組織修復(fù)。它在多種生物學(xué)過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,尤其是在免疫細(xì)胞的啟動(dòng)和組織損傷后的修復(fù)過程中。TNFSF12的功能與機(jī)制TNFSF12通過其胞外區(qū)與受體TNFRSF12A(也稱為TWEAKR或Fn14)結(jié)合,啟動(dòng)下游的信號(hào)通路。TNFSF12的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)依賴于其受體的胞內(nèi)段結(jié)構(gòu)域,能夠啟動(dòng)NF-κB、MAPK和JNK等信號(hào)通路,進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的存活、增殖和炎癥反應(yīng)。在免疫系統(tǒng)中,TNFSF12通過啟動(dòng)免疫細(xì)胞(如T細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞),促進(jìn)免疫反應(yīng)。此外,TNFSF12在組織損傷后的修復(fù)過程中也發(fā)揮重要作用,通過促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的重塑和細(xì)胞的遷移,加速組織修復(fù)。TNFSF12的功能異常與多種疾病相關(guān),如自身免疫性疾病、心血管疾病和瘤。重組人TNFSF12蛋白(hFcTag)的特點(diǎn)重組人TNFSF12蛋白(hFcTag)具有以下明顯特點(diǎn):高純度:純度≥95%(經(jīng)SDS-PAGE和SEC-HPLC驗(yàn)證),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。ApaI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 ApaI 對(duì)不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性。AluI酶
在生物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 AluI 則是其中一位“微雕大師”。它以其獨(dú)特的識(shí)別序列和切割方式,在基因工程、分子生物學(xué)研究以及遺傳學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。AluI 的識(shí)別序列是“AG^CT”,這一序列在基因組中相對(duì)常見,使得 AluI 能夠在多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行切割。它會(huì)在識(shí)別到該序列后,在“^”標(biāo)記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端。這種切割方式使得 AluI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在基因工程中,AluI 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這一過程不僅需要精細(xì)的切割,還需要切割后的片段能夠完美匹配,而 AluI 的黏性末端特性正好滿足了這一需求。AluI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 AluI 對(duì)不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。例如,在某些遺傳病的研究中,AluI 可以用來檢測(cè)基因突變,幫助科學(xué)家更好地理解疾病的遺傳機(jī)制。NsiI酶通過SDS-PAGE、Western blot、質(zhì)譜等方法驗(yàn)證蛋白的純度和分子量。通過活性測(cè)試評(píng)估蛋白的生物活性。
重組人Siglec-15(Recombinant Human Siglec-15)是一種經(jīng)HEK293細(xì)胞表達(dá)、C端融合His標(biāo)簽的跨膜唾液酸結(jié)合凝集素,分子量約35 kDa,純度≥95%(SDS-PAGE & SEC-HPLC),內(nèi)素<0.1 EU/μg。該蛋白在瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞、髓系抑制細(xì)胞及多種實(shí)體瘤表面高表達(dá),通過與未知唾液酸化配體結(jié)合,啟動(dòng)DAP12-Syk通路,抑制T細(xì)胞增殖并促進(jìn)PD-L1非依賴性免疫逃逸。本品保留天然N-糖基化位點(diǎn),可在體外重建“Siglec-15-Fc”或“Siglec-15-His”功能復(fù)合物,用于SPR、BLI測(cè)定與小分子、抗體或CAR結(jié)構(gòu)的親和力;亦可包板于ELISA,高通量篩選阻斷型抗體。凍干粉經(jīng)0.22 μm過濾除菌,復(fù)溶后4℃穩(wěn)定一周,-80℃長(zhǎng)期儲(chǔ)存避免反復(fù)凍融。配套提供生物素化版本(Biotin-Siglec-15),兼容鏈霉親和素磁珠,實(shí)現(xiàn)瘤浸潤(rùn)免疫細(xì)胞的原位捕獲與單細(xì)胞測(cè)序。每批次均通過阻斷實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證活性,附完整COA,是研究腫瘤免疫抑制機(jī)制與開發(fā)下一代免疫檢查點(diǎn)抑制劑的關(guān)鍵試劑。
人類SG3(Secreted Glycoprotein 3)是近年于胎盤外泌體中發(fā)現(xiàn)的Ⅰ型分泌蛋白,富含O-GalNAc糖簇,與胚胎著床、病遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移及代謝炎癥密切相關(guān),卻因天然豐度極低而研究受阻。本重組人SG3(aa 20-310)采用CHO-3E 懸浮平臺(tái),經(jīng)密碼子優(yōu)化與Kifunensine 處理保留高甘露糖型,C端6×His 標(biāo)簽經(jīng)Ni-NTA、ConA 親和與SEC 三步純化,SDS-PAGE呈彌散單條帶,質(zhì)譜糖譜顯示五糖關(guān)鍵+2 N-糖基,純度≥97%,內(nèi)素<0.02 EU/μg,可直接用于小鼠尾靜脈成像。功能驗(yàn)證:BLI 測(cè)得SG3 與胎盤外泌體膜蛋白Integrin α5β1 的親和力KD=12 nM;在THP-1 巨噬細(xì)胞模型中,100 ng/mL 重組SG3 誘導(dǎo)IL-10 上調(diào)3.8 倍,同時(shí)抑制LPS 觸發(fā)的TNF-α 釋放50%,提示其抗-促修復(fù)雙重功能。His 標(biāo)簽支持SPR、ELISA 及免疫組化,可高通量篩選SG3-受體拮抗肽或糖基化酶抑制劑。該蛋白為解決SG3 在母胎界面及病微環(huán)境中的“糖密碼”提供了高活性、可放大的研究級(jí)試劑。Cas12a不僅具有順式切割活性,還具備獨(dú)特的反式切割活性,這使得它能夠無差別地裂解附近的單鏈DNA。
在現(xiàn)代替物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 AseI 便是其中一位“精細(xì)剪刀”。它以其獨(dú)特的識(shí)別序列和精細(xì)的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。AseI 的識(shí)別序列是“AT^TTAAT”,這一序列在基因組中相對(duì)常見,使得 AseI 能夠在多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行切割。它會(huì)在“^”標(biāo)記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端。這種黏性末端的特性使得 AseI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在基因工程中,AseI 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割能力使得 AseI 成為處理復(fù)雜基因組時(shí)的理想選擇。AseI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 AseI 對(duì)不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。例如,在某些遺傳病的研究中,AseI 可以用來檢測(cè)基因突變,幫助科學(xué)家更好地理解疾病的遺傳機(jī)制。AseI 的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用是分子生物學(xué)領(lǐng)域的一大進(jìn)步。對(duì)于20 kb以上的長(zhǎng)片段擴(kuò)增,建議適當(dāng)延長(zhǎng)退火/延伸時(shí)間,并根據(jù)需要調(diào)整Mg2?和dNTP濃度。BspHI酶
Hot-Start Taq Master Mix (2×) (With Dye) 結(jié)合了熱啟動(dòng)技術(shù)熒光染料,為高效的基因擴(kuò)增提供了可靠的解決方案。AluI酶
重組人潛伏性TGF-β2蛋白(RecombinantHumanLatentTGF-β2)是一種重要的多功能細(xì)胞因子復(fù)合物,屬于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)超家族成員。TGF-β2與TGF-β1、TGF-β3同屬TGF-β亞型,廣參與胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、免疫調(diào)節(jié)及組織修復(fù)等生理過程。潛伏性TGF-β2由成熟TGF-β2肽段與其潛伏相關(guān)肽(Latency-AssociatedPeptide,LAP)通過非共價(jià)鍵結(jié)合形成,是TGF-β2在體內(nèi)的主要存在形式,能夠維持其非活性狀態(tài),防止過早啟動(dòng)。該重組蛋白通常采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如CHO細(xì)胞或HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。潛伏性TGF-β2在體外可被酸性環(huán)境、蛋白酶切割或整合素介導(dǎo)的機(jī)械力作用啟動(dòng),釋放出具有生物活性的成熟TGF-β2,進(jìn)而發(fā)揮生物學(xué)功能。研究表明,TGF-β2在眼部發(fā)育、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育及免疫穩(wěn)態(tài)維持中具有獨(dú)特作用,其異常表達(dá)與眼部疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病及病進(jìn)展密切相關(guān)。因此,重組人潛伏性TGF-β2蛋白不僅是研究TGF-β信號(hào)通路的重要工具,也為開發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價(jià)值。AluI酶