操作步驟按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或其他方法制備樣品液。取1毫升樣品液加入9毫升SCPB肉湯或堿性蛋白胨水中,36±1℃增菌培養(yǎng)18-24小時(shí)。用3毫米接種環(huán)取1環(huán)增菌液,劃線接種到弧菌顯色培養(yǎng)基上,做2個(gè)平板。36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí),觀察菌落顏色。應(yīng)用弧菌顯色培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于食品、海產(chǎn)品、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中弧菌的檢測(cè)。它能夠快速區(qū)分不同種類的弧菌,提高檢測(cè)效率,減少誤判。這種培養(yǎng)基的特異性高,可以克服傳統(tǒng)TCBS培養(yǎng)基引起的假陰性結(jié)果。總之,弧菌顯色培養(yǎng)基憑借其快速、準(zhǔn)確、特異性高的特點(diǎn),已成為檢測(cè)弧菌的重要工具,廣泛應(yīng)用于食品安全、疾病預(yù)防和環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基是一種用于快速檢測(cè)食品、水質(zhì)和環(huán)境中細(xì)菌總數(shù)的微生物培養(yǎng)基。心浸液瓊脂培養(yǎng)皿
念珠菌顯色培養(yǎng)基:精細(xì)檢測(cè)菌的高效工具念珠菌顯色培養(yǎng)基是一種用于快速檢測(cè)和鑒定菌屬菌的微生物培養(yǎng)基。其關(guān)鍵原理是利用酶底物法,通過顯色反應(yīng)來區(qū)分不同種類的菌。原理念珠菌顯色培養(yǎng)基含有特定的顯色底物,當(dāng)菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),其代謝產(chǎn)物會(huì)與顯色底物發(fā)生反應(yīng),使菌落呈現(xiàn)特定的顏色。例如,白色念珠菌在培養(yǎng)基上通常呈現(xiàn)綠色或藍(lán)綠色,熱帶菌呈現(xiàn)藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色,光滑菌呈現(xiàn)紫色,克柔假絲酵母菌呈現(xiàn)粉色,而其他菌則呈現(xiàn)白色。這種顯色特性使得菌能夠與其他微生物區(qū)分開來,提高了檢測(cè)的特異性和準(zhǔn)確性。制備時(shí),稱取4.85g培養(yǎng)基粉末加入100ml蒸餾水或純化水中,加熱煮沸至完全溶解,冷卻至45-50℃后傾注平皿,冷卻凝固后備用。操作步驟按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或其他方法制備樣品液。取樣品液涂布或劃線接種于平板上。在25-30℃培養(yǎng)48小時(shí)。觀察菌落顏色:白色念珠菌為綠色或藍(lán)綠色,熱帶菌為藍(lán)灰色或鐵藍(lán)色,光滑菌為紫色,克柔假絲酵母菌為粉色,其他菌為白色。對(duì)可疑白色念珠菌菌落可劃線接種到PDA瓊脂平板上,25-30℃培養(yǎng)24-48小時(shí),挑取單菌落做鏡檢和生化試驗(yàn)。心浸液瓊脂培養(yǎng)皿金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于食品安全檢測(cè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)和臨床診斷等領(lǐng)域。
在微生物培養(yǎng)過程中,雜菌污染是一個(gè)常見的問題,它會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。改良CCD瓊脂基礎(chǔ)通過優(yōu)化配方,增強(qiáng)了其抗物質(zhì)性能,能夠有效抑制雜菌的生長(zhǎng)。這種改良使得培養(yǎng)基在支持目標(biāo)微生物生長(zhǎng)的同時(shí),減少了雜菌的干擾。改良后的培養(yǎng)基在成分上進(jìn)行了調(diào)整,通過添加特定的抗物質(zhì)成分或調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的物理化學(xué)性質(zhì),提高了其對(duì)雜菌的抑制能力。例如,改良CCD瓊脂基礎(chǔ)可以通過調(diào)節(jié)pH值或添加抗菌劑,抑制雜菌的生長(zhǎng),從而為純培養(yǎng)提供良好的環(huán)境。這種抗物質(zhì)性能的提升,不僅提高了培養(yǎng)的純度,還減少了因雜菌污染導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)失敗,為微生物學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供了有力的支持。
平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA):菌落總數(shù)測(cè)定的通用培養(yǎng)基平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)是一種廣泛應(yīng)用于菌落總數(shù)測(cè)定的非選擇性固體培養(yǎng)基,適用于食品、化妝品、飲用水、奶制品等多種樣品中微生物的計(jì)數(shù)。制備方法為:稱取23.5g培養(yǎng)基干粉,加入1000ml蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15分鐘。檢驗(yàn)原理胰蛋白胨提供碳源和氮源;酵母浸粉提供B族維生素;葡萄糖提供能源;瓊脂作為凝固劑。應(yīng)用領(lǐng)域PCA培養(yǎng)基主要用于菌落總數(shù)的測(cè)定,廣泛應(yīng)用于食品、化妝品、飲用水等領(lǐng)域的微生物檢測(cè)。使用方法稀釋倒平板法:稱取23.5g培養(yǎng)基,加入1000ml蒸餾水,加熱煮沸至完全溶解,121℃高壓滅菌15分鐘。取樣品25g或25ml,溶解于225ml無菌生理鹽水或無菌磷酸鹽緩沖液中,進(jìn)行10倍梯度稀釋。選擇2-3個(gè)合適的稀釋度,吸取1ml稀釋液于無菌平皿中,加入45-50℃的培養(yǎng)基約15-25ml,混勻后冷卻凝固。翻轉(zhuǎn)平板,36±1℃培養(yǎng)48±2小時(shí)。平板涂布法:同稀釋倒平板法前幾步操作。將稀釋液0.1ml或0.2ml涂布于已倒好的平板上,36±1℃培養(yǎng)48±2小時(shí)。注意事項(xiàng)配制好的培養(yǎng)基應(yīng)盡快使用,避免長(zhǎng)時(shí)間放置導(dǎo)致細(xì)菌繁殖。倒平板時(shí),培養(yǎng)基溫度應(yīng)適宜,避免燙傷。
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基:快速檢測(cè)腸道致病菌的高效工具志賀氏菌顯色培養(yǎng)基是一種用于快速檢測(cè)食品、病人糞便樣品中志賀氏菌的微生物培養(yǎng)基。志賀氏菌是引起人類腸道疾病常見的病原菌,在我國(guó)被傳染性腹瀉病原菌中高居較早。因此,快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)志賀氏菌對(duì)于預(yù)防和控制食源性傳染病至關(guān)重要。原理志賀氏菌顯色培養(yǎng)基利用特異性酶底物法,使志賀氏菌在培養(yǎng)基上形成具有特征顏色的菌落。志賀氏菌通常顯白色或無色,有些宋內(nèi)氏志賀氏菌有藍(lán)色中心。這種顯色特性使得志賀氏菌能夠與其他非目標(biāo)菌(如大腸桿菌、沙門氏菌等)區(qū)分開來。制備時(shí),稱取36.0克培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于1000毫升蒸餾水中,冷卻至45-50℃后,傾入無菌平皿。操作步驟按標(biāo)準(zhǔn)方法制備樣品液。取1毫升樣品液加入冷卻至45-50℃的顯色培養(yǎng)基中混勻,或涂布于平板上。在36±1℃培養(yǎng)20-24小時(shí)。觀察菌落顏色:志賀氏菌顯白色或無色,有些宋內(nèi)氏志賀氏菌有藍(lán)色中心。優(yōu)點(diǎn)快速檢測(cè):20-24小時(shí)內(nèi)即可得到結(jié)果。高特異性:通過顯色反應(yīng),能有效區(qū)分志賀氏菌與其他非目標(biāo)菌。操作簡(jiǎn)便:無需復(fù)雜的設(shè)備和步驟。應(yīng)用志賀氏菌顯色培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于食品安全檢測(cè)、水質(zhì)監(jiān)測(cè)和臨床診斷等領(lǐng)域。廢棄的培養(yǎng)皿浸泡在消毒水中,殘留的培養(yǎng)基像褪色的水彩,漸漸沉入容器底部。木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
清洗培養(yǎng)皿時(shí),試管刷在玻璃壁上旋轉(zhuǎn)出細(xì)密的泡沫,殘留的培養(yǎng)基碎屑逐漸被沖走。心浸液瓊脂培養(yǎng)皿
樣芽胞桿菌顯色培養(yǎng)基:高效檢測(cè)食品中的致病菌蠟樣芽胞桿菌顯色培養(yǎng)基是一種用于快速檢測(cè)食品、水、乳制品和肉制品中蠟樣芽胞桿菌的微生物培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基通過特異性的顯色反應(yīng),使蠟樣芽胞桿菌在培養(yǎng)基上形成藍(lán)綠色的菌落,并且菌落周圍有一圈不透明環(huán)。這種顯色特性使得蠟樣芽胞桿菌能夠與其他非目標(biāo)菌(如枯草芽胞桿菌、金黃色葡萄球菌等)區(qū)分開來。制備時(shí),稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基7.95g,加入180ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取0.6g蠟樣芽胞桿菌添加劑,加入20ml無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動(dòng)5-10分鐘,使其乳化均勻。將二者分別于121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻至45-50℃左右時(shí),把蠟樣芽胞桿菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,輕輕混勻,傾入無菌平皿。操作步驟按GB標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液。樣品液在30±1℃增菌培養(yǎng)18-24小時(shí)。取增菌液劃線接種于蠟樣芽胞桿菌顯色培養(yǎng)基平板上,36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)。蠟樣芽胞桿菌典型菌落為藍(lán)綠色且菌落周圍有一不透明環(huán)。若24小時(shí)沒有出現(xiàn)典型菌落,可延長(zhǎng)培養(yǎng)至48小時(shí)。對(duì)可疑蠟樣芽胞桿菌可劃線接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,30±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí),挑取單菌落做蠟樣芽胞桿菌全套生化試驗(yàn)。心浸液瓊脂培養(yǎng)皿