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天津HE染色公司

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-07-29

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點(diǎn),促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合,其本身不參與染色的反應(yīng)。當(dāng)蘇木素染色效能極高,很短時(shí)間就導(dǎo)致核漿共染時(shí),可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過2%),抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時(shí)間,同時(shí)也能提高蘇木素染色的清晰度?,F(xiàn)在有商用的HE染色液賣,但是質(zhì)量參差不齊。如果課題組較大,完全可以自己配制,效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,即可完全成熟,染色效果好,氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶,這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一)。HE染色過程中常見的問題以及應(yīng)對(duì)方法。天津HE染色公司

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HE染色結(jié)果判讀:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),伊紅著色由淺變深。H-E染色評(píng)定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均勻,無皺褶無刀痕;(2)染色核漿分明,紅藍(lán)適度,透明潔凈,封裱美觀。上海質(zhì)量好的HE染色多少錢關(guān)于HE染色,你不知道的實(shí)驗(yàn)技巧。

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HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,樣品處理:a.對(duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對(duì)于冰凍切片:蒸餾水2分鐘。c對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水,再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對(duì)于上述處理好的樣品:蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液,約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。此時(shí),如果需要直接觀察,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。

HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片。骨組織及鈣化病灶,經(jīng)過固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,才能進(jìn)行常規(guī)切片。如果脫鈣不全,則切片容易撕開或碎裂,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣。骨組織固定24小時(shí)后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,進(jìn)行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時(shí)間,但長時(shí)間浸于強(qiáng)酸會(huì)影響切片染色效果。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時(shí)后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時(shí)脫水、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、切片南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。HE染色,即是蘇木精-伊紅染色法,是形態(tài)學(xué)比較常用的染色方法。

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HE染色樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,確保組織位置規(guī)整。補(bǔ)充少許液態(tài)的石蠟后,進(jìn)行降溫冷凍,使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達(dá)到組織固定的效果,然后使用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片,厚度在4-8um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟:將待測(cè)組織樣本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,這樣可以在進(jìn)行染液染色的時(shí)候,染液可以充分進(jìn)入組織種,同時(shí),二甲苯還可以起到透明的作用,使切片更容易觀察。HE染色技術(shù)幾種常見的染色問題。海南HE染色價(jià)格

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HE染色注意事項(xiàng):1、染色時(shí)調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時(shí)間長,組織酸化而影響細(xì)胞核著色。因此,要在自來水中沖洗時(shí)間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,這樣可以使細(xì)胞核著色較深。染伊紅時(shí)胞漿著色不佳,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染蘇木精后,分色這一步是關(guān)鍵,應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行,一般以細(xì)胞核染色清楚(晰)而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時(shí)間將導(dǎo)致染色太淺,應(yīng)重新染色后再行分色。3、切片經(jīng)酒精脫水后,入二甲苯時(shí)可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),此為脫水不徹底,應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精,更換酒精、二甲苯,以求徹底脫水與透明。4、在染色過程中不要讓切片干燥,以免切片收縮、變形,影響神經(jīng)元形態(tài)。5、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前,切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分。6、***封固時(shí),要用中性樹脂,防止日后褪色,蓋片要選大于組織塊的面積,如漏出一部分不久將會(huì)褪色,所用樹脂濃度要適當(dāng),樹脂封固時(shí)不能有氣泡。天津HE染色公司