Mayer等（2023）以measles virus(麻疹病毒，MV)為例，評(píng)估了四種不同核酸酶（BenzonaseTM、DeneraseTM、M-SAN HQ中鹽核酸酶及SAN HQ高鹽核酸酶）對(duì)于染色質(zhì)DNA去除的效果。Vero細(xì)胞通過(guò)微載體貼壁培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)麻疹病毒MV，72h后收獲上清液，使用3μm cellulose filter(Sartorius)過(guò)濾后分裝多份，置于-80℃保存便于后續(xù)使用。在解凍后的上清中調(diào)節(jié)對(duì)應(yīng)鹽濃度，并加入50 U/ml核酸酶，37℃孵育2hr進(jìn)行消化，消化后留樣；將消化后上清液過(guò)Capto Core 700 (Cytiva)柱子，收集流穿液，之后洗雜、洗脫，并分別留樣。通過(guò)SDS-PAGE分析發(fā)現(xiàn)，相比Benzonase等傳統(tǒng)核酸酶，在生理鹽條件下M-SAN HQ中鹽核酸酶更高效將染色質(zhì)DNA剪切成更小片段，甚至將核小體DNA剪切更徹底。常州中鹽核酸酶產(chǎn)品質(zhì)量哪家好呢，歡迎咨詢(xún)上海倍篤生物 。山西70950-150中鹽核酸酶用途

Medium-Salt Active Nuclease High Quality (M-SAN HQ，中鹽核酸酶)，是用Pichia pastoris表達(dá)的重組非特異內(nèi)切核酸酶，廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中，在生理鹽條件下去除雙鏈及單鏈的DNA及RNA。這款核酸酶的適宜pH范圍很廣（pH 7.2-8.7），且在125-250 mM鹽濃度內(nèi)具有適宜活性。在細(xì)胞培養(yǎng)液或收獲的培養(yǎng)上清中，不需調(diào)整任何組分，直接加入M-SAN HQ即可表現(xiàn)高核酸酶活性。相比傳統(tǒng)的全能核酸酶，M-SAN HQ中鹽核酸酶在生理鹽條件下，對(duì)HCD的去除更高效、更徹底。因此，M-SAN HQ中鹽核酸酶非常適合部分病毒載體（如慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒及溶瘤病毒等）的生產(chǎn)。江蘇國(guó)內(nèi)中鹽核酸酶價(jià)格表上海中鹽核酸酶售后服務(wù)哪家好呢，歡迎咨詢(xún)上海倍篤生物 。

慢病毒大規(guī)模純化的捕獲步驟包括：膜過(guò)濾澄清，隨后切向流過(guò)濾/超濾或者體積排阻色譜濃縮。此外，需用核酸酶（benzonase或M-SAN HQ中鹽核酸酶）來(lái)去除細(xì)胞殘留的、質(zhì)粒來(lái)源的DNA污染。這兩個(gè)步驟順序可以調(diào)整，依據(jù)項(xiàng)目工藝而定。兩種工藝路線各有優(yōu)缺點(diǎn)：先用核酸酶消化的優(yōu)點(diǎn)是可去除大的DNA片段，且后續(xù)步驟可以去除殘留核酸酶；但所用的核酸酶的量也非常大。與此相反，將核酸酶步驟后置的優(yōu)點(diǎn)是大幅降低核酸酶的量(成本降低)；但后面的步驟必須有將核酸酶去除的能力。此外，后期用核酸酶的缺點(diǎn)是核酸污染可能會(huì)結(jié)合慢病毒顆粒形成沉淀，進(jìn)而導(dǎo)致慢病毒在純化中流失，從而影響得率。

在生物工藝中，核酸酶的主要作用是高效消化宿主細(xì)胞DNA（HCD），并將其分解成足夠小的片段，以便在下游純化過(guò)程中去除。雖然大多數(shù)核酸酶可以在生理鹽條件下高效地將裸DNA降解成微小片段，比如Benzonase和SANs都可以把dsDNA分解成小于8nt的寡核苷酸鏈，但實(shí)際生產(chǎn)中的核酸污染情況更加復(fù)雜。HCD通常以染色質(zhì)形式存在，與細(xì)胞裂解碎片、病毒顆粒等結(jié)合在一起，影響核酸酶的識(shí)別及剪切。因此，HCD去除的關(guān)鍵在于——核酸酶如何在復(fù)雜的生產(chǎn)體系中識(shí)別并剪切HCD。衢州中鹽核酸酶售后服務(wù)哪家好呢，歡迎咨詢(xún)上海倍篤生物 。

核酸酶活性受到很多因素影響，如鹽濃度、pH、底物、溫度等。因此，不同客戶(hù)、不同項(xiàng)目中核酸酶的使用條件都不一。目前，生物制藥行業(yè)對(duì)Benonase全能核酸酶的使用比較熟悉，如生理鹽或低鹽濃度、脫鹽操作等。對(duì)于大部分使用Benzonase的項(xiàng)目，使用M-SAN HQ中鹽核酸酶可以完全替代，而且溫度、Mg2+濃度等條件不用做任何調(diào)整，同樣酶量的M-SAN HQ對(duì)宿主細(xì)胞DNA（HCD）的去除效果更好、病毒載體得率更高。經(jīng)過(guò)工藝優(yōu)化后，可以將M-SAN HQ中鹽核酸酶的用量減少到原來(lái)的1/3-1/2，且HCD去除效果及產(chǎn)品得率更高。致力于從深海microbe中識(shí)別新的冷適應(yīng)酶，用于分子研究、IVD和biopharma領(lǐng)域。青海國(guó)內(nèi)中鹽核酸酶銷(xiāo)售電話

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染色質(zhì)由組蛋白和DNA組成，——147個(gè)堿基對(duì)的DNA纏繞在8個(gè)組蛋白（由H2A、H2B、H3和H4形成的八聚體）周?chē)?，形成基本的染色質(zhì)單位，即核小體。核小體像珠串一樣串連在一起，并被包裝成更高階的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)。DNA帶負(fù)電荷，富含堿性氨基酸的組蛋白帶正電荷，且組蛋白多聚物有很多疏水區(qū)段。所有這些特點(diǎn)導(dǎo)致宿主DNA殘留（HCD）能吸附很多物質(zhì)，包括宿主蛋白殘留（HCD）、色譜填料、目的病毒顆粒等，因此，HCD的存在增加了工藝流程的復(fù)雜度，同時(shí)也降低了病毒顆粒的穩(wěn)定性。山西70950-150中鹽核酸酶用途