酶標(biāo)儀的使用:
1. 準(zhǔn)備工作:在使用酶標(biāo)儀之前,需要將儀器進(jìn)行預(yù)熱,并根據(jù)實驗需要選擇合適的濾光片。同時,需要將標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測樣品的反應(yīng)體系準(zhǔn)備好。
2. 測量吸光度:將標(biāo)準(zhǔn)曲線和待測樣品分別加入反應(yīng)體系中,然后將反應(yīng)體系放入酶標(biāo)儀中進(jìn)行測量。在測量過程中,需要選擇合適的波長和濾光片,并設(shè)置好空白對照組。
3. 計算結(jié)果:根據(jù)測量結(jié)果,可以計算出待測樣品中物質(zhì)的含量。具體計算方法如下:
(1)根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出各個標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值和物質(zhì)含量。
(2)根據(jù)待測樣品的吸光度值和標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出待測樣品中物質(zhì)的含量。
(3)根據(jù)實驗需要進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析。
酶標(biāo)儀比較廣地應(yīng)用在臨床檢驗、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中。陜西多功能酶標(biāo)儀廠家直銷
如何測定的吸光度范圍?
通常,酶標(biāo)儀的吸光度測定范圍在0-2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標(biāo)儀可測定的吸光度一般在0-2.5之間,但現(xiàn)在基本上都做了拓寬,可達(dá)到3.5以上,并且能保持很好的精密度與線性。
對于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。
酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測,一般為硅光管或光導(dǎo)纖維,除測定通道外,有的酶標(biāo)儀還有一個參比通道,每次測定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)功能如何,均可通過酶標(biāo)儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度等體現(xiàn)出來。光學(xué)系統(tǒng)好的話,則上述指標(biāo)也應(yīng)較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道可避免因通道不同所致的差異。
江蘇性能穩(wěn)定酶標(biāo)儀樣品檢測濾光片酶標(biāo)儀也有優(yōu)勢,例如價格較為便宜,檢測靈敏度高,帶寬的可選擇性。
酶標(biāo)儀在糧油檢測上的應(yīng)用:
不管是淀粉廠、面粉廠、糧油企業(yè),還是糧食收購站、糧食儲備庫、糧食局、糧庫等,都離不開酶標(biāo)儀!在這些行業(yè)中,酶標(biāo)儀主要承擔(dān)的任務(wù)是進(jìn)行的檢測,常檢測是嘔吐。
檢測按實驗流程為:稱量、加提取液、振蕩混勻、離心或過濾,然后進(jìn)行加樣、洗板、孵育、加底物、加終止液,然后由酶標(biāo)儀讀數(shù),計算結(jié)果。根據(jù)實驗流程,酶標(biāo)儀配套的設(shè)備有天平、旋渦混合器、離心機(jī)、移液器、電熱恒溫培養(yǎng)箱以及試劑盒。
寶予德K3 Plus酶標(biāo)儀光學(xué)系統(tǒng)包括以下部件:
光源:光源為裝有鍍鋁橢圓反射器的石英鹵鎢燈(Osram 64607A,8V/50W)。為了延長燈具的使用壽命,不使用時請關(guān)閉儀器。開始測量前,必須先預(yù)熱一(1)分鐘。
斬光輪:斬光輪截斷光束,以盡可能減少電子噪音。
半透明鏡:光束穿過聚光透鏡后照射到半透明鏡上。部分可見光與所有長波長均穿過鏡片及UV,而剩下的可見光反射到其它地方。此裝置能夠減少干涉濾光片的發(fā)熱,并使光譜強(qiáng)度分布均勻。
干涉濾光片:濾光片輪的一到八(1到8)個濾光片中選擇波長。
光纖束:穿過干涉濾光片后,光束到達(dá)光纖束的端點,光束折射為八(8)束平行向上的光線。
聚焦透鏡:經(jīng)折射后,光線穿過由八(8)個透鏡組成的聚焦系統(tǒng)。
檢測器:光束經(jīng)孔板底部,樣品及上部透鏡,***進(jìn)入檢測器,由檢測器測量光的強(qiáng)度。
光柵型濾光系統(tǒng)具有使用方便,可以進(jìn)行光譜掃描,靈活性等優(yōu)點。
雙波長檢測的原理:在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收多的光能量。如果選擇其它的波長段,就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,在測定檢測物時,我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測,稱為測量波長。一般來說在ELISA操作中出現(xiàn)的黃顏色溶液,在450nm波長下會有比較大的吸收值。但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下,檢測物光的吸收小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。在ELISA酶標(biāo)儀中一般采用比較長作為參照波長,以消除非特異性吸收以及底部的指紋等其他干擾。所以在做現(xiàn)代ELISA實驗時,比較好能選擇雙波長進(jìn)行讀數(shù),可比較大限度的消除指紋、雜質(zhì)及不透光的物質(zhì)對酶標(biāo)儀讀數(shù)帶來的誤差,以保證實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。光吸收酶標(biāo)儀是用來進(jìn)行可見光與紫外光吸光度的檢測。貴州雙檢測模式酶標(biāo)儀高清觸屏
酶標(biāo)儀單波長檢測是指在一個波長下測量吸光度(也稱為終點法)。陜西多功能酶標(biāo)儀廠家直銷
酶標(biāo)儀的震板功能是指酶標(biāo)儀在對ELISA板孔進(jìn)行比色測定前對其進(jìn)行振蕩混勻,使板孔內(nèi)顏色均一。目前市場上常見的酶標(biāo)儀均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋轉(zhuǎn)等方式及振蕩幅度等任意調(diào)節(jié);有的則較為固定。使用有震板功能的酶標(biāo)儀,在進(jìn)行ELISA測定顯色反應(yīng)完成加入終止劑后,可不必振蕩混勻,直接放人酶標(biāo)儀上測定即可。溫育功能是指酶標(biāo)儀本身能按要求自動精確地控制儀器內(nèi)部的溫度,使得ELISA測定中微孔板條的溫育過程可在儀器內(nèi)部完成,而無需再外配溫箱。目前,只有少部分酶標(biāo)儀具有此種功能,溫育功能只是酶標(biāo)儀的一個附加功能,是否具有并不能說明酶標(biāo)儀檔次的高低及儀器的優(yōu)劣。作為實驗室是否選擇,則可根據(jù)自己實驗室的條件及需要來決定。陜西多功能酶標(biāo)儀廠家直銷
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