什么是細(xì)胞培養(yǎng)：細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物或植物中提取細(xì)胞，然后在人工環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)以進(jìn)行科學(xué)研究。較早的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是在100多年前開發(fā)的，為科學(xué)的巨大突破做出了貢獻(xiàn)。如今，它已成為全世界實(shí)驗(yàn)室用于研究細(xì)胞的生理學(xué)、生物化學(xué)、疾病潛在機(jī)制以及藥物和有毒化合物的作用的基本工具。它也可用于在藥物篩選和大規(guī)模制造生物化合物，諸如疫苗和治病性蛋白質(zhì)。貯存：培養(yǎng)基在30℃下放置1天，無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。快速升溫至目標(biāo)溫度（如121°C）可確保徹底殺滅微生物（包括耐熱芽孢），避免因升溫慢導(dǎo)致滅菌不徹底。海南培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)

培養(yǎng)基的實(shí)驗(yàn)室制備：1.水：除特定要求,實(shí)驗(yàn)室用水的電導(dǎo)率在25℃下應(yīng)不高于25uS/cm(相當(dāng)于電阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染應(yīng)不超過103CFU/mL，較好低于102CFU/mL。應(yīng)根GB/T5750.12或其他有效方法,定期檢驗(yàn)微生物的污染。2.稱量和復(fù)水：稱量所需量的脫水培養(yǎng)基(注意防止吸入粉末，尤其是含有有害物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培養(yǎng)基結(jié)塊)后再加水至所需的量。3.溶解和分裝：脫水培養(yǎng)基加水后適當(dāng)加熱,并不攪拌使其快速溶解，必要時(shí)，重新溶解。含瓊脂的培養(yǎng)基在加熱溶解前應(yīng)浸泡幾分鐘。海南培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)需具備±1°C以內(nèi)的精確控溫，避免溫度波動(dòng)影響滅菌效果或成分穩(wěn)定性。

培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正：因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會(huì)有所變化，培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正。例如，牛肉浸液約可降低pH0.2，而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因此，對(duì)這個(gè)步驟，操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的較終PH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。PH調(diào)整后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。培養(yǎng)基的過濾澄清：液體培養(yǎng)基必須澄清，瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無明顯沉淀，因此，須要采用過濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法，濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形，以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。

制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：（1）方法步驟：計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。（2）倒平板操作的步驟：①將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。③用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。④等待平板冷卻凝固，大約需5～10min。然后，將平板倒過來放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。培養(yǎng)基制備器必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標(biāo)簽!

制備培養(yǎng)基有什么要求：1、培養(yǎng)基需保持澄清，便于觀察細(xì)菌的生長情況，培養(yǎng)基加熱煮沸后，可用脫脂棉花或絨布過濾，以除去沉淀物，必要時(shí)可用雞蛋白澄清處理，所用瓊脂條要預(yù)先洗凈晾干后使用，避免因瓊脂含雜質(zhì)而影響透明度。2、盛裝培養(yǎng)基不宜用鐵、銅等容器，使用洗凈的中性硬質(zhì)玻璃容器為好。3、培養(yǎng)基的滅菌既要達(dá)到完全滅菌目的，又要注意不因加熱而降低其營養(yǎng)價(jià)值，121℃15min即可，如為含有不耐高熱物質(zhì)的培養(yǎng)基如糖類、血清、明膠等，則應(yīng)采用低溫滅菌或間歇法滅菌，一些不能加熱的試劑如亞碲酸鉀、卵黃、TTC、克菌素等，待基礎(chǔ)瓊脂高壓滅菌后涼至50℃左右再加入。溶解不完全需延長加熱時(shí)間或降低投料量。海南培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)

縮短冷卻時(shí)間可加速后續(xù)分裝、倒平板等操作。海南培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)

牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基(又稱營養(yǎng)肉湯,用于培養(yǎng)細(xì)菌)：成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸餾水(或去離子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:將各成分溶解于水中，于20~25℃條件下以1mol/LNaOH溶液用pH計(jì)校正pH7.4,分裝三角瓶(裝量以三角瓶容積的1/2~2/3為宜)，或試管(分裝量以試管高度的1/4左右為宜),0.1MPa滅菌15~20min后備用?；瘜W(xué)分類：天然培養(yǎng)基指一類利用動(dòng)、植物或微生物體包括其提取物制成的培養(yǎng)基。如牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、麥芽汁培養(yǎng)基等。組合培養(yǎng)基又稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基，是一類按微生物的營養(yǎng)要求精確設(shè)計(jì)后用多種高純化學(xué)試劑配制成的培養(yǎng)基。如葡萄糖銨鹽培養(yǎng)基、淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基等。半組合培養(yǎng)基指一類主要以化學(xué)試劑配制，同時(shí)還加有某種或某些天然成分的培養(yǎng)基。例如，馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。海南培養(yǎng)基制備器售后服務(wù)