細(xì)胞凍存概念:細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無動(dòng)物源組份。昆明正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)
含血清細(xì)胞凍存液凍存細(xì)胞時(shí)遇到的問題:1.凍存細(xì)胞時(shí)需現(xiàn)配凍存液(如購(gòu)買市面上通用的含血清細(xì)胞凍存液,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步驟繁瑣,耗時(shí)耗力。3.含血清,細(xì)胞污染(細(xì)菌、霉菌和支原體等)的風(fēng)險(xiǎn)更高。4.血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。Cellregen無血清細(xì)胞凍存液的凍存方法是:將細(xì)胞凍存懸液(凍存管或孔板)直接放置-80℃冰箱長(zhǎng)期保存。金華正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液直銷價(jià)無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì):因不含血清,批次間差異小。
無血清細(xì)胞凍存液復(fù)蘇細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟:1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4.清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。
無血清細(xì)胞凍存液是一種無血清細(xì)胞凍存液,通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(tumour細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞),凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存(>5年)。CELLSAVING配方成分明確,不含動(dòng)物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細(xì)胞的安全。細(xì)胞凍存液操作簡(jiǎn)便,無需程序降溫,可在-80度或液氮中長(zhǎng)期保存。相比于傳統(tǒng)凍存液,埃澤思生物推出的此款凍存液可以明顯增加細(xì)胞活力,穩(wěn)定保持細(xì)胞特性,以及細(xì)胞多能性,并且可以穩(wěn)定保持細(xì)胞的正常核型和增殖能力。細(xì)胞凍存液已經(jīng)經(jīng)過動(dòng)物直接注射實(shí)驗(yàn)檢測(cè),包括靜脈注射,皮下注射途徑,無明顯細(xì)胞毒性,動(dòng)物安全性非常高。需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存。
無血清細(xì)胞凍存液的使用方法及注意事項(xiàng):1.將分裝好的細(xì)胞凍存管,直接置于-80度冰箱過夜保存,次日投入液氮中保存即可備注:1、凍存過程中,第2步在冰袋附近操作時(shí),低溫避免保護(hù)劑對(duì)細(xì)胞造成損傷。2、細(xì)胞凍存管一定要保證完全密封,否則在復(fù)蘇過程中有可能會(huì)炸(1)提前開啟水浴鍋,溫度調(diào)節(jié)到37(2)將凍存的細(xì)胞冷凍管從液氮中取出,迅速置于水浴鍋中融化,盡量1min融化,時(shí)間越短,對(duì)細(xì)胞影響越小。(3)將融化后的含細(xì)胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻,(如細(xì)胞冷凍保存液為500ul,則加入到5ml新鮮培養(yǎng)基中,如細(xì)胞冷凍保存液位1ml,則加入10ml新鮮培養(yǎng)基中。)(4)混勻后立即離心,800轉(zhuǎn),3min即可離心結(jié)束后棄上清,加入預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液。(5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(二氧化碳濃度根據(jù)培養(yǎng)基要求決定,通常為5%【注意事項(xiàng)】細(xì)胞系凍存密度備注正常人成纖維細(xì)胞1~310cells/ml雜交瘤細(xì)胞1~310cells/ml某些hybridoma會(huì)因冷凍濃度太高而在解凍24小時(shí)后死去。無血清凍存液特性:不含動(dòng)物成分。無錫無血清細(xì)胞凍存液廠家
無血清細(xì)胞凍存液存儲(chǔ)條件:為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低。昆明正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)
無血清細(xì)胞凍存液相對(duì)于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)有:1.即用型,無需現(xiàn)配,直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型,適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞。3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡(jiǎn)單。4.不含血清,較大減少細(xì)胞污染。5.因不含血清,批次間差異小。6.無需液氮,-80℃冰箱長(zhǎng)期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時(shí)可節(jié)省篩選過程。無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動(dòng)物源成分,含DMSO、糖類、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液。昆明正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)