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浙江磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學分析方法

來源: 發(fā)布時間:2022-05-16

蛋白翻譯后修飾位點鑒定:蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Post-Translational Modifications, PTMs)幾乎參與了細胞所有正常生命活動的過程,并發(fā)揮十分重要的調(diào)控作用。蛋白質(zhì)修飾位點能夠影響蛋白的多種屬性,包括蛋白質(zhì)折疊、活性以及之后的功能,對于蛋白質(zhì)修飾位點的發(fā)現(xiàn)及研究對闡明蛋白質(zhì)的功能具有重要作用。技術特點:時間快,周期短;識別位點準確,采用高分辨率質(zhì)譜技術可以準確定位到發(fā)生修飾的氨基酸位點。適用范圍:已知蛋白序列;明確翻譯后修飾的類型。蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學是植物體內(nèi)比較常見的PTM修飾手段。浙江磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學分析方法

泛素化修飾蛋白質(zhì)組學的作用:泛素化、心血管等疾病的發(fā)病密切相關。因此,作為近年來生物化學研究的一個重大成果,它已然成為研究、開發(fā)新藥物的新靶點。技術原理是首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物,然后使用液相色譜對酶解后的肽段混合物進行組分分離以降低樣本復雜程度,然后通過高質(zhì)量的泛素化修飾抗體和生物材料對修飾肽段進行富集,之后上樣至液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜中進行分析定量。技術優(yōu)勢:高特異性的修飾抗體;高分辨率、高靈敏度質(zhì)譜儀;鑒定通量高;可與代謝組學等進行多組學聯(lián)合分析。濟南蛋白質(zhì)亞硝基化修飾組學價格樣品中翻譯后修飾蛋白質(zhì)含量低、動態(tài)范圍廣給相關研究帶來了很大的挑戰(zhàn)。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾介紹:蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學修飾過程。蛋白質(zhì)翻譯后修飾(PTMs)通過給蛋白質(zhì)添加磷酸酯,乙酸酯,酰胺基或甲基等官能團增加蛋白質(zhì)組的功能多樣性,并影響正常細胞生物學和發(fā)病機理的幾乎所有方面。蛋白質(zhì)翻譯后修飾在許多細胞過程中起著關鍵作用,如細胞分化、蛋白質(zhì)降解、信號傳導和調(diào)節(jié)過程、基因表達調(diào)節(jié)以及蛋白質(zhì)相互作用。蛋白質(zhì)翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化,糖基化,泛素化,亞硝基化,甲基化,乙?;?,脂質(zhì)化和蛋白水解。因此,PTM的特征(包括修飾類別和修飾位點)在細胞生物學以及疾病診斷和預防研究中至關重要。

泛素化修飾蛋白質(zhì)組技術原理:首先將蛋白樣本酶解成肽段混合物,然后使用液相色譜對酶解后的肽段混合物進行組分分離以降低樣本復雜程度,然后通過高質(zhì)量的泛素化修飾類抗體和生物材料對修飾肽段進行富集,之后上樣至液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜中進行分析定量。技術優(yōu)勢:1、高特異性的修飾類泛抗體;2、高分辨率、高靈敏度質(zhì)譜儀;應用領域:泛素化修飾還參與了細胞周期、增殖、細胞凋亡、分化、轉錄調(diào)控、基因表達、轉錄調(diào)節(jié)、信號傳遞、損傷修復、炎癥免疫等幾乎一切生命活動的調(diào)控。泛素化心血管等疾病的發(fā)病密切相關。因此,作為近年來生物化學研究的一個重大成果,它已然成為研究、開發(fā)新藥物的新靶點。乙?;揎検侵冈诿富蚍敲缸饔孟?,將乙酰CoA的乙酰基基團轉移至蛋白質(zhì)氨基酸的殘基上。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾組學產(chǎn)品:常規(guī)的蛋白質(zhì)組學研究往往只關注不同生理、病理條件下蛋白質(zhì)表達水平的變化。然而,越來越多的研究發(fā)現(xiàn),許多重要的生命活動、疾病發(fā)生不僅與蛋白質(zhì)的豐度相關,更重要的是被各類蛋白質(zhì)翻譯后修飾所調(diào)控。因此深入研究蛋白質(zhì)翻譯后修飾對揭示生命活動的機理、篩選疾病的臨床標志物、鑒定藥物靶點等方面都具有重要意義。由于翻譯后修飾的蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低、動態(tài)范圍廣,質(zhì)譜分析前需要對修飾進行富集以提高其豐度。乙酰化修飾是體內(nèi)保守的可逆轉的蛋白修飾。濟南蛋白質(zhì)亞硝基化修飾組學價格

蛋白質(zhì)乙?;揎?,顧名思義指的就是在蛋白質(zhì)原有基礎上面嫁接上乙?;鶊F。浙江磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學分析方法

乙酰化修飾蛋白組學應用方向:1、乙?;揎椗c細胞基因表達調(diào)控、表觀調(diào)控、細胞凋亡、細胞代謝、信號轉導、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性等生理過程研究。2、乙?;鸬拇x疾病、代謝紊亂發(fā)生等疾病機理研究。乙?;飳W意義:1、調(diào)節(jié)DNA-蛋白、蛋白-蛋白相互作用;2、與其他PTMs發(fā)生crosstalk;3、調(diào)節(jié)酶活性;4、調(diào)控蛋白亞細胞定位。生物領域各個研究方面,如:1、農(nóng)林領域:抗逆脅迫機制,生長發(fā)育機制,育種保護研究等;2、 畜牧業(yè):肉類及乳品質(zhì)研究,致病機理研究等。浙江磷酸化修飾蛋白質(zhì)組學分析方法