RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開發(fā)出來的，RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設(shè)計的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細胞和ai細胞的培養(yǎng)，包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質(zhì)細胞和ai細胞，是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA，這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對廣的細胞培養(yǎng)應(yīng)用，我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。RPMI-1640細胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。

專為原代細胞和神經(jīng)細胞優(yōu)化，DMEM/F12助力復雜研究突破。安徽RPMI-1640細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家

    培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通常可耐受260mOsm/kg～320mOsm/kg。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細胞所需pH在-。但是，細胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進行緩沖，因此，氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5％，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為；如果CO2濃度維持在10％，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下，細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。安徽RPMI-1640細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家M199含有獨特的成分，包括腺嘌呤、腺苷、次黃嘌呤、胸腺嘧啶、以及其他的維生素。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必要的一種營養(yǎng)，但其在溶液中不安定，會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞危害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不會自發(fā)的降解。細胞運用其機制是：在細胞培訓時，細胞會日益向培養(yǎng)液中獲釋一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收運用。細胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)方針相像，連續(xù)的將低濃度水準的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成剩余的氨，更有利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無須適應(yīng)，并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間，縮減傳代次數(shù)，即節(jié)約了時間也節(jié)省了錢財。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培訓的細胞相比之下，活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時間。NEAA（非須要氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能下降細胞培育時細胞自身生產(chǎn)非須要氨基酸的副作用，有效性推動細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需。

    1.細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結(jié)團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點是營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好，但缺點是成分復雜，來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。MEM α培養(yǎng)基是一種改良的MEM培養(yǎng)基，與MEM培養(yǎng)基相比MEM α培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富。

在細胞培養(yǎng)實驗里，DMEM 培養(yǎng)基的使用過程需嚴謹規(guī)范。收到培養(yǎng)基后，應(yīng)及時存放于 2-8°C 的環(huán)境中，低溫可有效減緩培養(yǎng)基內(nèi)成分的降解速度，確保其營養(yǎng)成分的穩(wěn)定性。在使用前，需將培養(yǎng)基預(yù)熱至 37°C，模擬人體體溫環(huán)境，讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時，由于 DMEM 培養(yǎng)基多采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，需將培養(yǎng)環(huán)境的 CO?濃度維持在 5 - 10%，以此精細調(diào)控培養(yǎng)基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區(qū)間，為細胞打造穩(wěn)定且舒適的 “居住空間”，促進細胞健康生長。Ham’s F-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液，在低血清含量下時，特別適合單細胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)。湖北iclean細胞培養(yǎng)基廠家直銷

MCDB是為特定細胞設(shè)計的低蛋白和無血清培養(yǎng)的培養(yǎng)基。安徽RPMI-1640細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家

    任意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度，簡便快捷。高糖型培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞、各種原代病毒寄主細胞、單一細胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn)，例如運用CHO細胞表述EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適宜代謝效用較慢、依賴性貼壁細胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的海洋生物緩沖劑，對細胞無毒性效用，添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間維持恒定的PH范圍，可以有效性的以防培養(yǎng)液PH波動較大對細胞生長產(chǎn)生不利于的影響?？捎糜跓oCO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色，PH值～，**適宜細胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些弱點，研究說明酚紅可以模擬固醇類***（特別是雌***）的功用，因此在用到雌***敏感的細胞時（如乳腺組織），**好用到不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀抵消。青霉素-鏈霉素混合液一般而言也被稱做“雙抗”，是體外培養(yǎng)中為防止微生物污染**常用的***，其中，青霉素能夠擾亂細菌細胞壁的合成，對革蘭陽性菌特別有效性。安徽RPMI-1640細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家

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