豬只可經自然放血或頸動脈放血(上圖),本文只介紹自然放血。2.1將合乎要求的康復豬放置在操作臺上,捆住四肢保定牢固。2.2頸部作剪毛和消毒處理(酒精棉球擦拭);殺豬刀消毒。生理鹽水洗刷盛血容器一次,控干,蓋好蓋子。注意:少量剩余生理鹽水在容器內無大礙,且有利于血清析出。2.4殺豬、放血至容器。自然放血很大的問題就是放血是否徹底。在實踐中,經常出現(xiàn)豬只已死,血還沒有放完的情況,加之自然放血也很易收到污染,因此作者建議,有條件的應盡量采取頸動脈放血術實行放血。3.血清析出。3.1將盛血的容器靜置于室內,讓其自然凝固,析出血清。不可搖晃,以免溶血。3.2一般在秋冬季10-20℃環(huán)境下,3-4小時即可析出血清。3.3在血清析出過程中,可在中間檢查一次,若見血清上漂浮大塊血凝塊,則可用消毒手術刀輕輕劃動,讓血塊分散,以利血清更好析出。3.4不同情況下,豬只采集血量和制得的血清量有差異。若放血完全,可參考表1得出血清量。我們的新生牛血清,具有良好的批次穩(wěn)定性,確保您的實驗數(shù)據(jù)準確可靠,助力科研成果產出。蘇州動物血清哪家好
4.血清分裝。4.1血清完全析出后,將血凝塊撈出丟棄并妥善處理。4.2將容器內的血清用注射器抽取后,或用漏斗直接分裝至空的生理鹽水瓶中。注意裝量不可太滿,一般以容量的80%為宜,即標稱500ml的實際裝400ml。4.3剩余血清若混有較多血細胞,仍可收集使用。如有離心機,也可經3000轉/分,經3分鐘離心取上清液.5.血清水浴滅活;加入“雙抗”。5.1將水浴鍋加水調至56℃。水線以淹沒血清的高水平線為宜。5.2血清置水浴鍋,經30分鐘水浴。5.3將血清冷卻,加入“雙抗”。建議按照每400ml血清添加青霉素1,000萬單位、鏈霉素300萬單位?,F(xiàn)在也有按照100ml血清添加2.5ml的5%恩諾沙星注射液的。二者皆可。寧波羊血清廠家云海生物致力于為客戶提供優(yōu)良的產品和專業(yè)的服務,我們的專業(yè)團隊將竭誠為您解答疑問。
何謂熱滅活?有必要做熱滅活嗎?一般以56℃、30分鐘來處理已解凍的血清,因為這一加熱步驟可使補體去活性。補體所參與的反應有:溶細胞活性、平滑肌的收縮、肥大細胞和血小板組胺的釋放,可增強吞噬作用,促使淋巴細胞、巨噬細胞的趨化。實驗顯示,經過正確處理的熱滅活丨血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。因為,經過處理的血清對細胞生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。經過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會讓研究者誤以為是血清遭受污染。而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者認為是微生物的分裂擴增。因此,若非必須,可不做熱滅活。
胎牛血清功能及作用牛血清是細胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必需的營養(yǎng)成分,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。血清,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用:1.血清提供:營養(yǎng)和能量來源;生長和粘附因子,肽和類固醇;載體蛋白。2.保護細胞:免受蛋白酶、毒性物質、PH值波動、機械剪切力、氧化及自由基的損傷。云海生物提供專業(yè)的技術支持和客戶服務,我們的團隊隨時為您解答疑問,并提供實驗方案和建議。
胎牛血清的主要作用:1、提供對維持細胞指數(shù)生長的,某些含量微小營養(yǎng)物、低分子營養(yǎng)物質,促進細胞生長繁殖;2、提供貼壁因子,是細胞貼壁、鋪展在玻璃或塑料培養(yǎng)基質上所需因子的來源;3、提供蛋白酶抑制劑,中和剩余的胰蛋白酶的消化,使其失活,保護細胞不受傷害;4、提供pH緩沖,有酸堿緩沖液的作用,保護細胞不受傷害;(注:因此培養(yǎng)基加入胎牛血清后pH可能會發(fā)生變化,應根據(jù)實際情況再次調節(jié)pH)5、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到祛毒作用。6、提供營養(yǎng),內含各種蛋白可提供細胞分裂所需的營養(yǎng)物質。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到祛毒作用。(注:如培養(yǎng)基成分已經較為豐富完善,例如DEME培養(yǎng)基,則血清提供的營養(yǎng)物質作用不明顯。)選擇云海生物的新生牛血清,就是選擇專業(yè)與放心,我們始終與您并肩,共創(chuàng)美好未來。四川羊血清生產廠家
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當血清需要被解凍時,我們不建議大家把剛從-20℃中拿出的冰凍血清,直接放入4℃冰箱中過夜融化,也不要在室溫進行過夜解凍。由于血清含有蛋白質等干物質,這類物質容易先融化析出,水這類溶劑后融化,導致血清產生沉淀,影響使用效果。因此,要盡可能保證所有成分同步融化,因此我們建議使用三步法融化,具體步驟見下表。需要注意的是,如果血清是儲存在-80℃冰箱中,三步法解凍前,應先將血清轉移至-20℃冰箱中存放1-2天。一次解凍后,分裝至無菌離心管中,盡量保證每管是一次的用量,分裝管解凍也遵循三步法,解凍后需全部用完。蘇州動物血清哪家好