HE染色伊紅著色淡分析及應(yīng)對原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5;(2)藍化液殘留過多;(3)切片太薄;(4)切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時間過長。對策:檢查伊紅染液的pH值,如果必要的話,用乙酸將其調(diào)節(jié)在4~5之間,從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍化步驟完成后,使用的弱堿性溶液被充分洗去,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度。脫水時不要讓切片在低濃度乙醇停留時間過長,因為含水多的低濃度乙醇會將伊紅的顏色分化掉。HE染色是組織學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中比較基礎(chǔ)、使用比較普遍的技術(shù)方法之一。江蘇比較好的HE染色多少錢
HE染色不管怎么操作,始終無法染色或淡染答:這種情況一般因為組織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補救:防患于未然,要么使用新鮮的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一點碳酸鈉中和甲酸。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定;對于已經(jīng)制出的片子,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上,然后自來水漂洗5min,可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,補充染色媒介,增強蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。江西比較好的HE染色報告骨組織HE染色的操作流程。
HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,重新處理。將切片水洗數(shù)分鐘,然后重新脫水、透明、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,盡量不要讓其干燥。細(xì)胞核呈紅、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足。對策:首先,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時更換。其次,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氫鈉等,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍化時間。
HE染色觀察細(xì)胞凋亡,凋亡檢測中形態(tài)學(xué)方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細(xì)胞進行染色后,在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,通過觀察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備:對于貼壁細(xì)胞,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,讓培養(yǎng)細(xì)胞長于玻片上,然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出,用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細(xì)胞,用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后,離心1000r/min收集細(xì)胞,用PBS洗2次,收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml,涂片或用離心甩片,用4%多聚甲醛固定5min;在光學(xué)顯微鏡下,貼壁細(xì)胞由原來的梭形或多角形變小、變圓,核呈藍色或藍黑色,胞漿呈淡紅色,核固縮、破碎,形成凋亡小體等。懸浮細(xì)胞,整個細(xì)胞皺縮,核固縮,破碎,形成凋亡小體,染色質(zhì)顏色加深等。常規(guī)HE染色和特殊染色服務(wù)。
HE染色原理:易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia);而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性(neutrophilia)。構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多,它們有不同的等電點。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,pH值升高時,則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性;pH值降低時,原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝浴K哉f染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。脫氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,所以細(xì)胞核被染成藍色。石蠟組織切片的HE染色。江蘇HE染色哪家好
HE染色試驗技術(shù)及注意事項。江蘇比較好的HE染色多少錢
HE染色在**染色中的應(yīng)用,小細(xì)胞肺*是肺*中分化程度比較低、惡性程度比較高的一種惡性**,生長迅速,轉(zhuǎn)移較早,五年存活率*為1%-2%,預(yù)后非常差。其小細(xì)胞肺***細(xì)胞HE染色的特征,主要表現(xiàn)為組織結(jié)構(gòu),包括巢狀、小梁狀、實性片狀,常有菊形團形成,*巢周圍的瘤細(xì)胞呈柵欄狀排列,*細(xì)胞較小,一般小于三個靜止的淋巴細(xì)胞,呈圓形、卵圓形或短梭形,胞質(zhì)稀少,胞界不清,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,核仁缺乏或不明顯,核分裂象每十個高倍視野大于十一個,常見大片狀壞死。江蘇比較好的HE染色多少錢